关于TLC的一些知识

chem 5210 0

药化实验室监测反应最常用的手段就是TLC板监测,它能更快更直观的监测出原料有没有反应,反应体系杂不杂及柱层析时产物所在试管位置。TLC板监测只能观察到原料是否反应,不能确定新生成化合物的分子量及是否为目标产物,除非有对照点。

在合成实验室,一定要熟练掌握有关TLC板的一些知识,它是有机入门的基本功之一,一定要认真对待。现在很多公司都有lcms机器,大多数人都不喜欢点板监测反应,一般都是送个lcms,然后坐等结果,自己也不点板监测反应;如果机器上样少,等的时间不会太久。如果样多,可能需要等几个小时,这就很尴尬了;做两三个lcms就下班了,这一天轻松是轻松,但是怎么和领导汇报工作呢?因此要灵活应用TLC板的相关知识,不能完全依赖lcms。


举一些经常会发生的例子
做新反应时,按照文献上报道的反应时间去监测反应,可能原料早已反应完全,也可能原料只反应了一小部分。如果我们用lcms监测反应,从送样到出结果可能要一段时间甚至几个小时,反应是让它继续搅着?还是先停掉?产物在反应体系内搅的时间久了,有没有可能会变坏?如果我们用TLC监测,分分钟内就可以直观的看出原料是否反应完全;如果反应完了,先将反应停掉,送一个lcms确定分子量即可。如果原料没有转化完全,可以适当地延长反应时间,观察原料是否继续转化;如果原料继续转化,可以延长反应时间,实时监测。如果不转化,考虑是否需要补加其它试剂等,做好实时监测。做反应的目的是想办法将它做好,而不是投完反应就不管不顾了。
柱层析时我们需要用TLC板来确定哪几个试管里的产物是纯的,如果每一管都送lcms,估计实验室其他人会疯掉。现在大家一般都是用过柱机过柱子,然后按照机器上的峰型来收集对应的试管,几乎很少再对每一个试管进行点板检测。很多时候过柱机的分离效果并不太好,建议TLC检测每一根含有产物的试管,把那些含有纯产物的试管收集起来,比较杂的试管另外处理。如果不进行TLC检测,浓缩后发现产物不纯,这时还要再纯化一次,劳人伤神。
柱层析淋洗液比例的确定。柱层析和TLC板都是正向体系,一般是用TLC板来确定柱层析淋洗液比例。对于那些比较容易分离的产物,淋洗液比例比较容易确定;但是对于那些难分离的产物,我们就需要用TLC板来摸索溶剂种类及比例,甚至有时一块板要反复地进行层析。TLC板为柱层析淋洗液的选择提供支持。
检测打浆出来的产物、制备出来的产物及过反相出来产物的纯度,有时也可以对买来的原料进行检测。一般情况下,如果化合物在TLC板上是一个点且在反相上也是一根峰,那么这个化合物的纯度应该很高,完全可以满足核磁的要求。如果不行,那就没必要去打核磁了。


有关TLC板的一些基本内容
TLC板的种类

目前实验室用的TLC板一般都是买来的,应该不会有小伙伴自己手动铺TLC板了。在售的TLC板有一下三种类型,如下图

关于TLC的一些知识  第1张

第一类是直接切好的小板,拆开后可以直接使用;但是这种板的口碑不怎么好,很多人都说容易掉硅胶。这种版我也用过几次,不同厂家的TLC板确实差别很大;可以先少买一点,好用了再多买一些。第二类是机器划好的板,需要自己动手掰成一个一个的小板,目前这种板在药化实验室用的还是比较多的,口碑也很好。第三类需要自己用玻璃刀划开,很考验技术,划这种小板唯一的感觉就是掰的手疼;以前用的都是这种板,现在逐渐被淘汰了。

如果TLC板比较紧缺,我们可以把用过的TLC板重复利用。操作方法:将用过的TLC板放在大极性的展开剂里一段时间,将板拿出,晾干即可重复使用。大极性展开剂一般选DCM:MeOH=10:1,只能回收用紫外灯显色的板,用显色剂显色的板无法重复利用。


如何点板

点板要好好学,虽然看着十分的简单。简单介绍一下点板

关于TLC的一些知识  第2张


点板时一定要规范一些,让其他人也能一目了然地看出大体意思。建议每次监测反应时都要点混合点(M),如果产物和原料极性很近,没有混合点做对比时,很难判断原料是否反应了。有混合点的存在也能排除其它一些外在因素对点板情况的影响,如TLC板受潮、反应液里有大极性的溶剂及TLC板本身存在缺陷造成溶剂展开不均匀等。

如果反应液用的溶剂为DMF/DMSO之类,我们可以将点好的TLC板先放在小极性的溶剂里展开一次,然后拿出来用吹风机吹干,再用合适的极性展开即可避免这类溶剂的影响;或者取一些反应液加到子弹头里,加水和EA萃取后,再点板。以上两种方法都很实用。


TLC监测的一些经验

实验室最常用的显色方法是紫外灯显色法。
原料和产物都有荧光,但是原料在365波长下几乎不显色,产物有很浓的蓝光。这时无论在监测反应,还是柱层析时,我们都可以借助产物在365波长下的这一特性,对其进行后处理。特别是原料和产物在TLC板上极性很近时,利用这个特异性能够很好的帮助我们判断原料是否消耗完。
有些硝基化合物在TLC板上有很明显的黄色,我们可以根据这个特性来分离及判断硝基化合物。
有些反应会用到一些无荧光的原料,反应结束后,经过洗萃处理,我们需要对有机相点个板,在紫外灯下标记出嫌疑产物的位置,然后再用其它显色剂对TLC板进行显色;如果无荧光的原料和产物离地很远或体系内已经没有该原料时,我们可以大胆地进行柱层析分析。如果无荧光的原料和产物离的很近,这时柱层析时要两种显色方法相结合,尽量将该原料除去。
化合物在TLC板上飘的很严重,怀疑是不是TLC板潮解了,可以用吹风机加热干燥一下,待晾凉后再点板、展开一次。一般来说,TLC板是需要放在干燥器里的。


发布评论 0条评论)

您需要 登录账户 后才能发表评论

还木有评论哦,快来抢沙发吧~